پایان نامه در حوزه روش مطمئن و کاربردی جهت انجماد و ذوب تخمک های (اووسیست) ماهی سفید

پایان نامه در حوزه روش مطمئن و کاربردی جهت انجماد و ذوب تخمک های (اووسیست) ماهی سفید

پایان نامه در حوزه روش مطمئن و کاربردی جهت انجماد و ذوب تخمک های (اووسیست) ماهی سفید

چکیده : انجماد اووسیت های ماهی بدلیل اینکه دارای پوسته ای با نفوذپذیری پایین نسبت به آب و ضدیخ هستندو حساسیت بالایی به سرما دارند بسیار مشکل است. در این پژوهش انجماد شیشه ای اووسیت های ماهی سفید Rutilus frisii kutum بوسیله انجماد سریع انجام شده است تا با حفظ حیات تخمک های بالغ ماهی سفید از آنها برای IVF استفاده شود. تمام تلاش طی انجماد و ذوب اووسیت ها به کار برده شده تا حداقل جراحت و آسیب به تخمک وارد شود. در تحقیق حاضر انجماد با محلول های انجمادی دی متیل- سولفوکساید( Me2so)٬ متانول(MEOH ) واتیلن گلیکول(Ethylene glycol) انجام شد و میزان زنده مانی اووسیت های ماهی پس از انجماد با استفاده از دو محیط کشت پایه برای ذوب بررسی گردید. برای انجماد اووسیت ها ابتدا آزمایش تعیین غلظت بافرkcl انجام شد. سپس اووسیت های به تعادل رسیده در بافر٬ طی مراحلی درمحلول انجمادی Vs( (Vitrification solution) قرار گرفته ومنجمد شدند. نتایج آزمایش تعیین میزان سمیت در دو زمان 30 و15 دقیقه نشان داد٬ محلول Vsکه در بافرkcl به حجم رسیده بود سمیت کمی داشته است. اووسیت های منجمد شده بلا فاصله در حمام آب و سپس محلول گلوکز 5/0 مولار٬ ویا در محلول متعادل کننده (Equilibration solution) Es2 در 4 مرحله انتقال داده شدند و بدین طریق عمل ذوب صورت گرفت و زنده مانی اووسیت ها با استفاده از تریپان بلو ارزیابی شد. نتایج نشان داد که با استفاده از محلول Vs٬ درصد بالایی از تخمک ها به خوبی منجمد شده و بقای اووسیت های ذوب شده با استفاده از محلول Es2بالاتر از محلول گلوکز5/0مولار بوده است. انجماد شیشه ای اووسیت های ماهی سفیدR. frisii kutum برای اولین بار انجام شده است. در طول دوره انکوباسیون پس از ذوب شدن٬ تعدادی از اووسیت ها متورم شده و نیمه شفاف مشاهده شدند که ممکن است بدلیل ذوب شدن دانه های ریز زرده در داخل زونا پلوسیدا باشد که با تشکیل یخ میان سلولی و یا افزایش فشار اسمزی بوجود آمده اند.

واژگان کلیدی: اووسیت٬ انجماد شیشه ای٬ذوب٬ بافرkcl

...

فرمت فایل: DOC word (قابل ویرایش) تعداد صفحات: 54

برای دانلود فایل اینجا کلیک کنید

پس از خرید فایل، در قسمت نظرات ، درخواست خود را درمورد امضای درخواستی ثبت کنید.

بیاد داشته باشید که ثبت شماره تراکنش خرید فایل و آدرس ایمیل خود، الزامی می‌باشد.

پس از بررسی و تایید خرید شما، امضای هدیه طی چهار روز، به ایمیل شما ارسال خواهد شد.